जर्नल ऑफ माइक्रोबियल एंड बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी

अमूर्त

हेजहॉग सीरम से एल-एस्पेरैगाइनेज का पृथक्करण, आंशिक शुद्धिकरण और लक्षण वर्णन

एक्पा इमैनुएल, नज़ेलिबे एचसी और ओन्यिके ई

ल्यूकेमिया के उपचार के अन्य स्रोतों की खोज की आवश्यकता ने इस वर्तमान कार्य को प्रेरित किया। यह पहले से ही ज्ञात है कि एल-एस्पेरेगिनेज में श्वेत रक्त कोशिका के कैंसर के उपचार में बहुत अधिक क्षमताएं हैं, लेकिन इस एंजाइम के स्रोत और इसके गुण इस दवा की प्रभावकारिता निर्धारित करते हैं। आम तौर पर, एंटी-ट्यूमर थेरेपी में उपयोग के लिए एस्परेगिनेज के आदर्श रूप से उपयुक्त होने के लिए, इसे कई मानदंडों को पूरा करना पड़ता है। जिस जीव का चयन किया जाता है, उसे उच्च मात्रा या उपज में एस्परेगिनेज का उत्पादन करना चाहिए, और इसे सरल स्तनधारी स्रोतों से अलग करने में सक्षम होना चाहिए। एंजाइम के शुद्धिकरण के लिए विकसित की गई प्रक्रियाएँ यथासंभव तेज़ और सरल होनी चाहिए। शुद्ध किए गए एंजाइम में भंडारण पर दीर्घकालिक स्थिरता, शारीरिक pH पर अधिकतम गतिविधि और रक्त में सब्सट्रेट की सांद्रता से कम सब्सट्रेट के लिए Km होना चाहिए। इसलिए इस वर्तमान शोध का उद्देश्य हेजहॉग सीरम से इस एंजाइम को आंशिक रूप से शुद्ध करना और उसकी विशेषता बताना था ताकि संभावित भविष्य के चिकित्सा अनुप्रयोग के लिए प्रलेखित साहित्य से इसकी एंटी-ल्यूकेमिक क्षमताओं की तुलना की जा सके। एल-एस्पेरेजिनेज को हेजहॉग सीरम से अलग किया गया और आंशिक रूप से शुद्ध किया गया, जिसे अमोनियम सल्फेट फ्रैक्शनेशन, डायलिसिस और आयन एक्सचेंज और जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी के चार-चरणीय प्रोफाइल का उपयोग करके एंटी-वेनम सहित कई अन्य उपयोगी प्रोटीनों का भंडार माना जाता है। एंजाइम ने 77.58% की कुल उपज, इष्टतम पीएच और तापमान क्रमशः 7.8 और 39 डिग्री सेल्सियस और 0.0125 मिमी का Km दिया। जेल निस्पंदन ने 139,000 Da का अनुमानित आणविक भार दिया, जबकि SDS PAGE ने क्रमशः 36,000 और 34,600 Da का सबयूनिट आणविक भार दर्शाया। एंजाइम ग्लूटामाइन के हाइड्रोलिसिस को भी थोड़ा-बहुत उत्प्रेरित करता है। Mg2+ और Zn2+ हेजहॉग सीरम एल-एस्पेरेजिनेज के लिए उत्प्रेरक के रूप में काम करते हैं, जबकि Hg2+ जैसे भारी आयनों से अवरोध भी देखा गया। यह कार्य दर्शाता है कि इस एंजाइम के स्तनधारी स्रोत आने वाले समय में एस्परैगाइन पर निर्भर ट्यूमर के उपचार के लिए अधिक बेहतर हो सकते हैं।