कार्सिनोजेनेसिस और उत्परिवर्तन जर्नल

अमूर्त

लेमिन ए/सी और साइटोकेराटिन 18 के मध्यवर्ती फिलामेंट प्रोटीन मानव कोलन कार्सिनोमा कोशिकाओं में हेक्सामिनोलेवुलिनेट के साथ फोटोडायनामिक थेरेपी द्वारा एपोप्टोटिक प्रेरण में शामिल हैं

सुसान शाहज़िदी, मोल्डी सियोड, एंड्रियास ब्रेच, सेबेस्टियन पाट्ज़के, जाह्न एम. नेसलैंड और कियान पेंग

हेक्सामिनोलेवुलिनेट (HAL), 5-अमीनोलेवुलिनिक एसिड का एक हेक्साइलेस्टर, फोटोसेंसिटाइज़र प्रोटोपोरफिरिन IX (PpIX) का अग्रदूत है और इसका उपयोग कैंसर के फोटोडायनामिक थेरेपी (PDT) के लिए किया जाता है, जो प्रकाश-सक्रिय दवा के साथ एक स्थापित पद्धति है। हालाँकि, कैंसर कोशिकाओं को मारने में शामिल तंत्र अभी भी पूरी तरह से समझा नहीं गया है। हमारी पिछली रिपोर्ट (कैंसर लेट., 2013; 339: 25-32) ने मानव बी-सेल लिंफोमा कोशिकाओं में HAL-PDT-प्रेरित एपोप्टोसिस में टाइप-V इंटरमीडिएट फिलामेंट (IFs) के सदस्य लैमिन A/C के कैस्पेस-6-मध्यस्थ दरार की महत्वपूर्ण भूमिका दिखाई है। लैमिन A/C सभी प्रकार की कोशिकाओं में मौजूद होता है; जबकि साइटोकेराटिन 18, टाइप-I IFs का एक प्रमुख घटक, केवल उपकला कोशिकाओं और कार्सिनोमा में व्यक्त किया जाता है। इस अध्ययन में मानव कोलन कार्सिनोमा COLO 205 और HCC2998 सेल लाइनों में HAL-PDT-मध्यस्थता वाले एपोप्टोटिक प्रेरण में दो IF प्रोटीन, लेमिन A/C और साइटोकेराटिन 18 की भूमिकाओं पर ध्यान केंद्रित किया गया है। HAL-PDT-प्रेरित अपोप्टोसिस की पुष्टि दोनों सेल लाइनों में फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी, इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी और M30 साइटोडेथ™ ELISA द्वारा की गई थी। फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी, इम्युनोब्लॉट्स और इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री ने दिखाया कि लेमिन A/C और साइटोकेराटिन 18 दोनों एपोप्टोटिक प्रेरण में शामिल थे और विशिष्ट कैस्पेज़-6 अवरोधक ने न केवल दो IF प्रोटीन के विभाजन को रोका, बल्कि एपोप्टोटिक प्रेरण को भी रोका। siRNAs द्वारा लेमिन ए/सी और साइटोकेराटिन 18 दोनों को नष्ट करने से कोशिकाएं अपोप्तोटिक हो जाती हैं, जिससे इस परिकल्पना को बल मिलता है कि मानव कार्सिनोमा कोशिकाओं में HAL-PDT द्वारा अपोप्तोटिक प्रेरण के लिए लेमिन ए/सी और साइटोकेराटिन 18 दोनों का विघटन आवश्यक है।