जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

सी-किट+ कार्डियक प्रोजेनिटर कोशिकाओं की बढ़ी हुई उपज के साथ नवजात चूहे के कार्डियोमायोसाइट्स के अलगाव के लिए बेहतर विधि

जेनिफर रूटरिंग, मैथियास इल्मर, एलेजांद्रो रेसियो, माइकल कोलमैन, जोडी विकौकल और एकहार्ड अल्ट

सेल थेरेपी हृदय रोग के उपचार के लिए एक आशाजनक नए प्रतिमान का प्रतिनिधित्व करती है, जो औद्योगिक दुनिया में मृत्यु का एक प्रमुख कारण है। ऊतक निवासी सी-किट + कार्डियक प्रोजेनिटर कोशिकाओं (CPCs) की हाल ही में हुई खोज ने पुनर्योजी हस्तक्षेपों के लिए इन कोशिकाओं का चिकित्सीय रूप से दोहन करने के वैज्ञानिक प्रयासों को बढ़ावा दिया है, और कार्डियोमायोसाइट्स की प्राथमिक संस्कृति हृदय के अध:पतन और पुनर्जनन के अंतर्निहित बुनियादी आणविक तंत्रों की जांच करने के लिए एक सामान्य इन-विट्रो मॉडल है। कार्डियोमायोसाइट अलगाव के लिए वर्तमान प्रोटोकॉल अक्सर कम कोशिका उपज और फाइब्रोब्लास्ट की अपर्याप्त कमी का परिणाम देते हैं, जो फिर संस्कृति में कार्डियोमायोसाइट्स को बढ़ा देते हैं। इस प्रोटोकॉल में हम नवजात चूहे के कार्डियोमायोसाइट्स के अलगाव के लिए एक बेहतर विधि का वर्णन करते हैं जो CPCs की बढ़ी हुई उपज को भी सक्षम बनाता है। एंजाइमेटिक और मैकेनिकल ऊतक प्रसंस्करण की कोमल तकनीकें उच्च कोशिका संख्या और व्यवहार्यता सुनिश्चित करती हैं, जबकि बाद में पेरकोल घनत्व ढाल सेंट्रीफ्यूजेशन फाइब्रोब्लास्ट को कम करता है। हमने विभिन्न एंजाइमों के लाभों की तुलना की और पाया कि कोलेजनेज़ 2 अकेले कार्डियोमायोसाइट्स की बहुत अधिक पैदावार देता है, जबकि मैट्रेस™ एंजाइम मिश्रण के उपयोग से सी-किट+ सीपीसी की सापेक्ष उपज 35% तक बढ़ जाती है। इस प्रोटोकॉल के साथ अलग किए गए कार्डियोमायोसाइट्स और सीपीसी हृदय रोग की जांच के साथ-साथ सेल आधारित चिकित्सीय दृष्टिकोणों के लिए एक महत्वपूर्ण सेल स्रोत बन सकते हैं।