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प्रोटिओमिक दृष्टिकोण का उपयोग करके खरगोश की एपिडीडिमिस से रोगाणुरोधी गतिविधियों वाले अणुओं की पहचान और लक्षण वर्णन

रेड्डी केवीआर, सुकन्या देवा, क्लारा अरान्हा, मंदार एस. पटगांवकर और गौरी भोंडे

रोगाणुरोधी पेप्टाइड्स (AMPs) मेज़बान की जन्मजात प्रतिरक्षा प्रणाली के मुख्य घटक हैं और हमलावर रोगजनकों के खिलाफ़ मेज़बान की रक्षा की पहली पंक्ति बनाते हैं। वर्तमान अध्ययन में खरगोश, ओरीक्टोलोगस क्यूनिकुलस की एपिडीडिमल उपकला कोशिकाओं (EPECs) में संश्लेषित AMPs की पहचान करने और उनकी विशेषताएँ बताने का प्रयास किया गया। TLR-9 लिगैंड, CpG-ODN-2006 के साथ EPECs के एक्स-विवो प्रेरण के परिणामस्वरूप कई AMPs का अप-रेगुलेशन हुआ। इन अणुओं की पहचान प्रोटिओमिक दृष्टिकोण (अल्ट्राफिल्ट्रेशन, कैटियन-एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी, RP-HPLC, सुदूर पश्चिमी ब्लोटिंग - FWB, 2D-PAGE और MALDI-TOF-MS) का उपयोग करके एकत्रित एपिडीडिमल ऊतक होमोजीनेट्स के एसिड अर्क में की गई। एकत्रित RP-HPLC अंश (शिखर 1-5), जिसे खरगोश एपिडीडिमल स्रावी रोगाणुरोधी प्रोटीन (RESAMP) कहा जाता है, ने कई रोगजनकों के खिलाफ़ गतिविधि दिखाई। FWB, 2D-PAGE और MALDI-TOF-MS परिणामों से पता चला कि पहचाने गए लगभग 19 प्रोटीनों में से, चार प्रोटीन अनुक्रम (हीमोग्लोबिन-α/β सबयूनिट्स, ट्रांसथायरेटिन और कैलरेटिकुलिन) HIV एंटीजन (gp120, gp17, gp41, p24) के साथ प्रतिक्रिया करते पाए गए। चार अनुक्रमों में से एक (VLSHHFGKEFTPQVQ) ने हीमोग्लोबिन-β प्रोटीन के साथ 90% से अधिक समरूपता दिखाई। VLSHHFGKEFTPQVQ अनुक्रम वाले 29 मेर पेप्टाइड को खरगोश एपिडीडिमल हीमोग्लोबिन बीटा (REHbβP) के रूप में नामित किया गया। संश्लेषित पेप्टाइड ने उच्चतम संभाव्यता आधारित मोवसे स्कोर (पीबीएमएस) दिखाया और अच्छी जीवाणुनाशक गतिविधि (एस्चेरिचिया कोली, स्यूडोमोनस एरुगिनोसा, स्टैफिलोकोकस ऑरियस, स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स और कैंडिडा एल्बिकेन्स) का प्रदर्शन किया। आरईएचबीपी ने मानव एंडोसेर्विकल कोशिकाओं (एंड1/ई6ई7) और खरगोश एरिथ्रोसाइट्स के खिलाफ साइटोटॉक्सिसिटी नहीं दिखाई। इम्यूनोफ्लोरोसेंट परिणामों से पता चला कि आरईएचबीपी खरगोश के स्टीरियोसिलिया एपिडीडिमिस और स्खलित शुक्राणुओं के एक्रोसोम में स्थानीयकृत होता है। हमारी सर्वोत्तम जानकारी के अनुसार, यह खरगोश के एपिडीडिमिस में एएमपी का पता लगाने का वर्णन करने वाला पहला अध्ययन है।

अस्वीकृति: इस सारांश का अनुवाद कृत्रिम बुद्धिमत्ता उपकरणों का उपयोग करके किया गया है और इसे अभी तक समीक्षा या सत्यापित नहीं किया गया है।