जैवसमतुल्यता एवं जैवउपलब्धता जर्नल

अमूर्त

फार्माकोकाइनेटिक अध्ययन में इलेक्ट्रोस्प्रे टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री के साथ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा मानव प्लाज्मा में हाइड्रोक्सोकोबालामिन मात्रा का निर्धारण

गुस्तावो डी. मेंडेस, फैबियाना डी. मेंडेस, मारिनल्वा फरेरा सैम्पाइओ, एंटोनियो सर्जियो सिल्वेरा, लू शि चेन, खालिद एम. अलखार्फी और गिल्बर्टो डी नुक्की

आंतरिक मानक (आईएस) के रूप में पैरासिटामोल का उपयोग करके मानव प्लाज्मा में हाइड्रोक्सोकोबालामिन की मात्रा निर्धारित करने के लिए एक तेज़, संवेदनशील और विशिष्ट विधि का वर्णन किया गया है। विश्लेषक और आईएस को एक कार्बनिक विलायक (इथेनॉल 100%; -20 डिग्री सेल्सियस) का उपयोग करके तरल-तरल निष्कर्षण द्वारा प्लाज्मा से निकाला गया था। अर्क का विश्लेषण उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा इलेक्ट्रोस्प्रे टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एचपीएलसी-एमएस-एमएस) के साथ किया गया था। क्रोमैटोग्राफी प्रीवेल सी8 3 माइक्रोन, विश्लेषणात्मक स्तंभ (2.1×100 मिमी आईडी) पर की गई थी। इस विधि का क्रोमैटोग्राफिक रन टाइम 3.4 मिनट था और 5-400 एनजी.एमएल-1 (आर> 0.9983) की सीमा पर एक रैखिक अंशांकन वक्र था। मात्रा निर्धारण की सीमा 5 एनजी.एमएल-1 थी। आंतरिक मानक के उपयोग के बिना भी इस विधि को मान्य किया गया था। आईएस के साथ इंट्रा-बैच सत्यापन में सटीकता 9.6%, 8.9%, 1.0% और 2.8% थी जबकि आईएस के बिना 5, 15, 80 और 320 एनजी/एमएल के लिए क्रमशः 9.2%, 8.2%, 1.8% और 1.5% थी। आईएस के साथ इंट्रा-बैच सत्यापन में सटीकता 108.9%, 99.9%, 98.9% और 99.0% थी जबकि आईएस के बिना 5, 15, 80 और 320 एनजी/एमएल के लिए क्रमशः 101.1%, 99.3%, 97.5% और 92.5% थी। आईएस के साथ अंतर-बैच सत्यापन में सटीकता 9.4%, 6.9%, 4.6% और 5.5% थी जबकि आईएस के बिना 5, 15, 80 और 320 एनजी/एमएल के लिए क्रमशः 10.9%, 6.4%, 5.0% और 6.2% थी। आईएस के साथ अंतर-बैच सत्यापन में सटीकता 5, 15, 80 और 320 एनजी/एमएल के लिए क्रमशः 101.9%, 104.1%, 103.2% और 99.7% थी जबकि आईएस के बिना 5, 15, 80 और 320 एनजी/एमएल के लिए क्रमशः 94.4%, 101.2%, 101.6% और 96.0% थी। इस एचपीएलसी-एमएस-एमएस प्रक्रिया का उपयोग दोनों लिंगों (10 पुरुष और 10 महिलाएं) के स्वस्थ स्वयंसेवकों में 5000 μg के इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन के बाद हाइड्रोक्सो कोबालामिन के फार्माकोकाइनेटिक्स का आकलन करने के लिए किया गया था। स्वयंसेवकों में निम्नलिखित नैदानिक ​​विशेषताएं थीं (लिंग के अनुसार और औसत ± एसडी [रेंज] के रूप में व्यक्त): पुरुष: आयु: 32.40 ± 8.00 वर्ष [23.00-46.00], ऊंचाई: 1.73 ± 0.07 मीटर [1.62-1.85], शरीर का वजन: 72.48 ± 10.22 किलोग्राम [60.20- 88.00]; महिलाएं: आयु: 28.60 ± 9.54 वर्ष [18.00-44.00], ऊंचाई: 1.60 ± 0.05 मीटर [1.54-1.70], शरीर का वजन: 58.64 ± 6.09 किलोग्राम [51.70- 66.70]। हाइड्रोक्सोकोबालामिन प्लाज्मा सांद्रता बनाम समय वक्र से निम्नलिखित फार्माकोकाइनेटिक पैरामीटर प्राप्त किए गए: AUClast, T1/2, Tmax, Vd, Cl, Cmax और Clast। फार्माकोकाइनेटिक पैरामीटर Cmax के लिए 120 (± 25) ng/mL, AUClast के लिए 2044 (± 641) ng.h/mL, Clast के लिए 8 (± 3.2) ng.mL-1, T1/2 के लिए 38 (± 15.8) घंटे और Tmax के लिए 2.5 (रेंज 1-6) घंटे थे। महिला स्वयंसेवकों ने पुरुषों की तुलना में क्रमशः 2383 ± 343 ng.h/mL और 1.76 ± 0.23 L/hr, महत्वपूर्ण रूप से (p=0.0136) कम AUC (1706 ± 704) ng.h/mL) और बड़ी (p=0.0205) क्लीयरेंस (2.91 ± 1.41 L/hr) प्रस्तुत की। ये फार्माकोकाइनेटिक अंतर महिला रोगियों में विटामिन बी12 की कमी के उच्च प्रसार की व्याख्या कर सकते हैं । वर्णित विधि आंतरिक मानक के उपयोग के बिना अच्छी तरह से मान्य है और इस दृष्टिकोण की अन्य HPLC-MS-MS विधियों में जांच की जानी चाहिए।