उगंज़ाया म्याग्मारजव*, एनखचिमेग वंजिलदोर्ज, अल्टांतसेटसेग खाजिदसुरेन
मंगोलिया में अल्फाल्फा की 'बर्गलताई' किस्म सबसे महत्वपूर्ण चारा है और क्रॉस परागण के कारण पिछले दशकों में इसकी उपज में कमी आई है। यह अध्ययन एग्रोबैक्टीरियम द्वारा मध्यस्थता वाले आनुवंशिक परिवर्तन के माध्यम से 'बर्गलताई' किस्म के पत्तों के आकार को बढ़ाने के लिए किया गया था, जिसमें अरेबिडोप्सिस थालियाना के विकास विनियमन कारक AtGRF2 जीन को स्थानांतरित किया गया था । कैलस प्रेरण के लिए सात दिन पुराने हाइपोकोटाइल और कोटिलेडन एक्सप्लांट से इन विट्रो पुनर्जनन प्राप्त किया गया था। प्रेरित कैली का उपयोग शूट प्रेरण और प्रसार के लिए किया गया था। प्रोलिफेरेटेड शूट रूट इंडक्शन माध्यम में ले जाए गए। सबसे अच्छा कैली प्रेरण माध्यम MSB5 (मुराशिगे स्कोग का माध्यम गैंबोर्ग के विटामिन के साथ) माध्यम था, जिसमें 2 mg/L 2,4-D, 0.2 mg/L BAP और 1 mg/L NAA की खुराक दी गई थी, कैली से शूट प्रेरण और प्रसार माध्यम MSB5 माध्यम था जिसमें 1mg/L BAP, 0.1 mg/L NAA की खुराक दी गई थी, प्रोलिफेरेटेड शूट को आधी ताकत वाले MSB5 माध्यम पर जड़ दिया गया था जिसमें 0.5 mg/L NAA की खुराक दी गई थी। आनुवंशिक परिवर्तन के लिए, हाइपोकोटिल एक्सप्लांट को प्रारंभिक स्रोत के रूप में इस्तेमाल किया गया। कुल 235 एक्सप्लांट को परिवर्तन के लिए परखा गया और 30 एक्सप्लांट (12.7%) हाइग्रोमाइसिन एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति प्रतिरोधी थे और पौधों को पुनर्जीवित किया। पौधों को मिट्टी में स्थानांतरित किया गया और पुष्टि के लिए GUS हिस्टोकेमिकल परख और RT-PCR के लिए ताजा युवा पत्ती का उपयोग किया गया। उनमें से सात स्वतंत्र ट्रांसजेनिक पौधों (T6, 8, 11, 12, 13, 15, 22) की पूरी तरह से पुनर्जीवित पुष्टि की गई। अल्फाल्फा पत्ती के आकार के ट्रांसजेनिक 'बर्गल्टाई' सीवी में जंगली प्रकार की तुलना में 0.7 सेमी 2 की वृद्धि हुई । T6 और 11 लाइनों ने T1 संतानों में 3:1 पृथक्करण अनुपात दिखाया (X2=0.04-0.42, p ≤ 0.52-0.84)।