जर्नल ऑफ बैक्टीरियोलॉजी एंड पैरासिटोलॉजी

अमूर्त

फ्लेबोटोमस पापाटासी में पैराट्रांसजेनेसिस के लिए डिफेन्सिन को व्यक्त करने वाले आनुवंशिक रूप से इंजीनियर एंट्रोबैक्टर क्लोके की गतिशीलता और फिटनेस लागत

रंगिन अबासी, मरियम अखलागी, मोहम्मद अली ओशागी, अमीर अहमद अखावन, मोहम्मद रेजा याघूबी-इरशादी, रौनक बख्तियारी और फतेमेह मोहतरमी

पृष्ठभूमि: एंटरोबैक्टर क्लोके उपप्रजाति डिसॉल्वेंस जीवाणु फ्लेबोटोमस पापाटासी के आंत माइक्रोफ्लोरा का एक ज्ञात सहजीवी है , जो जूनोटिक क्यूटेनियस लीशमैनियासिस के लिए मुख्य वेक्टर है, और रेत मक्खियों में पैराट्रांसजेनेसिस के लिए नामित है। इस अध्ययन में, हमने पी. पापाटासी में 'ट्रोजन हॉर्स' के रूप में काम करने की इसकी क्षमता के लिए इंजीनियर ई. क्लोके की गतिशीलता और फिटनेस लागत का मूल्यांकन किया ।

विधियाँ: ई. क्लोके के इंजीनियर्ड स्ट्रेन को लगातार सक्रिय व्यक्त लाल फ्लोरोसेंट प्रोटीन प्लस डिफेन्सिन (ईसी-डीआर) प्लास्मिड के साथ रूपांतरित किया गया और लार्वा के भोजन के माध्यम से सैंड फ्लाई कॉलोनियों में खिलाया गया। एक जंगली प्रकार के जीवाणु (ईसी-डब्ल्यूटी) और बरकरार भोजन को नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया। रेत मक्खी के लार्वा के विभिन्न विकास चरणों में ईसी-डीआर की फिटनेस विशेषताओं के साथ-साथ गतिशीलता का परीक्षण समरूप नमूनों को चढ़ाकर और टेट-बीएचआई अगर माध्यम पर फ्लोरोसेंट व्यक्त करने वाली कॉलोनियों की गिनती करके किया गया।

परिणाम: लाल फ्लोरोसेंट प्रोटीन का उत्पादन करने वाले एंटरोबैक्टर क्लोके डीआर को लार्वा के बर्तनों में एक बार डालने पर 36 दिनों के बाद लार्वा की आंत से अलग किया जा सका। कई अनुप्रयोगों के साथ EC-DR का इनस्टार II लार्वा, प्यूपा और वयस्कों के उभरने के समय पर कोई नकारात्मक प्रभाव नहीं पड़ा, लेकिन पी. पापाटासी लार्वा की मृत्यु दर में थोड़ी वृद्धि हुई । प्रयोग ने पी. पापाटासी में ई. क्लोके डीआर के ट्रांस-स्टेडियल संचरण की कमी या कमजोरता की भी पुष्टि की। पी. पापाटासी के खाने के व्यवहार और अस्तित्व पर इसका न्यूनतम फिटनेस खर्च है ।

निष्कर्ष: इस अध्ययन के परिणामों से पता चला कि ई. क्लोके डीआर केवल वयस्क अवस्था में पी. पापाटासी के पैराट्रांसजेनेसिस के लिए उपयुक्त है क्योंकि यह ट्रांसस्टेडियल रूप से संचारित नहीं होता है।