जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

टीबीके1 का दोहराव सामान्य तनाव ग्लूकोमा वाले रोगी से आईपीएससी-व्युत्पन्न रेटिनल कोशिकाओं में ऑटोफैगी को उत्तेजित करता है

बड ए टकर, फ्रांसिस सोलिवन-टिम्पे, बेन आर रोस, क्रिस्टिन आर एनफिन्सन, एलन एल रॉबिन, ल्यूक ए विली, रॉबर्ट एफ मुलिंस और जॉन एच फ़िंगरट

टीबीके1 जीन का दोहराव सामान्य तनाव ग्लूकोमा (एनटीजी) का कारण बनता है; हालाँकि यह तंत्र जिसके द्वारा यह प्रतिलिपि संख्या भिन्नता रेटिना गैंग्लियन सेल मृत्यु की ओर ले जाती है, को अच्छी तरह से समझा नहीं गया है। रेटिना जैसे दुर्गम ऊतकों में उत्परिवर्ती जीन उत्पाद के कार्य या शिथिलता की जांच करने के लिए त्वचा-व्युत्पन्न प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (आईपीएससी) का उपयोग करने की क्षमता अब हमें इन विट्रो में रोग पैथोफिज़ियोलॉजी की जांच करने की क्षमता प्रदान करती है। टीबीके1-संबंधित एनटीजी वाले रोगी से प्राप्त डर्मल फाइब्रोब्लास्ट से आईपीएससी उत्पन्न किए गए थे, जो प्रतिलेखन कारक ओसीटी4, एसओएक्स2, केएलएफ4 और सी-एमवाईसी के वायरल ट्रांसडक्शन के माध्यम से थे। रेटिना प्रोजेनिटर सेल और बाद में रेटिना गैंग्लियन सेल-जैसे न्यूरॉन्स हमारे पहले से विकसित चरणबद्ध भेदभाव प्रोटोकॉल का उपयोग करके प्राप्त किए गए थे। TUJ1, MAP2, THY1, NF200, और ATOH7 के विरुद्ध लक्षित rt-PCR और NF200 और ATOH7 के विरुद्ध लक्षित इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के माध्यम से रेटिना गैंग्लियन जैसी कोशिकाओं में विभेदन प्रदर्शित किया गया। वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण ने प्रदर्शित किया कि TBK1 जीन दोहराव वाले NTG रोगियों से प्राप्त फाइब्रोब्लास्ट और रेटिना गैंग्लियन सेल-जैसे न्यूरॉन्स दोनों में LC3-II प्रोटीन (ऑटोफैगी का एक प्रमुख मार्कर) का स्तर बढ़ा है। TBK1 के दोहराव से पहले TBK1 की अभिव्यक्ति में वृद्धि देखी गई है और यहाँ हम प्रदर्शित करते हैं कि वही दोहराव LC3-II की सक्रियता की ओर ले जाता है। इससे पता चलता है कि TBK1- संबंधित ग्लूकोमा इस अपचय पथ के अनियंत्रण (अति-सक्रियण) के कारण हो सकता है।