जैव रसायन एवं विश्लेषणात्मक जैव रसायन

अमूर्त

रमन स्पेक्ट्रोस्कोपी से डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए क्षति का आकलन

औनर एडब्ल्यू और थॉमस जेसी

डबल स्ट्रैंडेड डीएनए ब्रेक [डीएसबी] और उसके बाद की मरम्मत डीएनए की क्षति को ठीक कर सकती है या गलती से उत्परिवर्तन का कारण बन सकती है जिससे कोशिका क्षति और बीमारी हो सकती है। डीएसबी को शुद्ध डीएनए नमूनों से अलग आणविक कंपन से उत्पन्न अलौह बिखरी हुई रोशनी का उपयोग करके रमन स्पेक्ट्रोस्कोपी से मापा जा सकता है । 20 एस और 2 संचय के एक्सपोजर समय के साथ, रमन विश्लेषण में पाया गया कि परिपत्र पीबीएस केएस + प्लास्मिड डीएनए कंपन पानी के खाली नियंत्रण के समान थे। पीबीएस केएस + सिंगल इकोआर 1 साइट के प्रतिबंध ने रैखिक डीएनए बनाया और 880, 1044, 1084, और 1458 सेमी ^-1 पर रमन चोटियों में महत्वपूर्ण वृद्धि हुई । डीएनए क्षति का रमन पता लगाने के लिए, मानव जर्कैट लिम्फोसाइट्स को ब्लियोसिन ™ के +/- 16 μg/ml में उगाया गया। ब्लियोसिन ^™ उपचारित कोशिकाओं से प्राप्त डीएनए ने 880, 1044, 1084 और 1458 सेमी ^-1 पर अनुपचारित कोशिकाओं की तुलना में बेहतर रमन अवशोषण प्रदर्शित किया। जर्कैट कोशिकाओं में प्रो-एपोप्टोटिक बैक्स प्रोटीन और p53 को व्यक्त करने की क्षमता की कमी होती है, फिर भी ब्लियोसिन ^™ एक्सपोजर ने TAp73 के स्तर को बढ़ा दिया और इसके बाद कोशिका मृत्यु हो गई। जैविक सामग्रियों में कम हस्तक्षेप और उच्च संवेदनशीलता के कारण, रमन स्पेक्ट्रोस्कोपी सापेक्ष DSBs की सीमा का तुलनात्मक रूप से अनुमान लगाने की एक तेज़ और सरल विधि है। धूमकेतु परख के विपरीत, जिसमें जीवित और मरने वाली कोशिकाओं के विश्लेषण की आवश्यकता होती है, पृथक डीएनए को लगभग किसी भी कोशिका से आसानी से पुनर्प्राप्त किया जा सकता है, संग्रहीत किया जा सकता है और बाद में DSB विश्लेषण किया जा सकता है।