चुन-टिंग यूएन, कैटपागावल्ली अशोकनाथन, एलेक्जेंड्रा डगलस-बार्डस्ले, केविन मार्के, पीटर रिग्सबी और डोरोथी ज़िंग
पर्टुसिस (काली खांसी) के टीके दुनिया भर में टीकाकरण कार्यक्रमों में एक आवश्यक भूमिका निभाते हैं और हिस्टामाइन संवेदीकरण परीक्षण (HIST) वर्तमान में अकोशिकीय पर्टुसिस युक्त संयोजन टीकों के लिए आधिकारिक बैच-रिलीज़ परीक्षण है। HIST, एक मूषक पशु परीक्षण होने के कारण, बड़ी परख परिवर्तनशीलता समस्याओं और नैतिक मुद्दों से ग्रस्त है। इसलिए, 3R के जवाब में, पर्टुसिस टॉक्सिन (PTx) के दो कार्यात्मक डोमेन के आधार पर एक जैव रासायनिक परख प्रणाली विकसित की गई है: एक एंजाइम सक्रिय A-प्रोटोमर और एक कार्बोहाइड्रेट बाइंडिंग B-ओलिगोमर। PTx विषाक्त प्रभावों के संबंध में इन दो जैव रासायनिक परीक्षणों की नैदानिक प्रासंगिकता का प्रदर्शन किया गया है। इस परख प्रणाली की व्यावहारिकता का आकलन करने के लिए, विधि हस्तांतरणीयता पर 9 देशों को शामिल करते हुए एक अंतरराष्ट्रीय सहयोगी अध्ययन भी किया गया था और दिखाया गया था कि इस परख प्रणाली को नियंत्रण प्रयोगशालाओं और वैक्सीन निर्माण सुविधाओं में आसानी से अपनाया जा सकता है। इस अपडेट में, हम विशिष्ट टीकों में अवशिष्ट PTx ADP-राइबोसिलट्रांसफेरेज़ और कार्बोहाइड्रेट बाइंडिंग गतिविधियों दोनों को मापने के लिए और अधिक अनुकूलित परख स्थितियाँ प्रदान करते हैं। सामान्य तौर पर, टीकों का उचित तनुकरण परीक्षण संवेदनशीलता को बढ़ाने में मदद करेगा। स्पाइकिंग प्रयोगों से पता चला कि कार्बोहाइड्रेट बाइंडिंग परख HIST के समान PTx के निम्न स्तरों का पता लगा सकता है। हालाँकि कुछ टीकों के लिए ADP-राइबोसिलट्रांसफेरेज़ गतिविधि परख में बढ़ते स्पाइक्स के साथ सकारात्मक प्रवृत्ति भी प्रदर्शित की जा सकती है, लेकिन स्पाइक किए गए टीकों की संख्या में परिणामी मूल्य सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं थे और यह बिना स्पाइक किए गए टीकों की उच्च आधारभूत गतिविधि के कारण है। चूँकि इस जैव रासायनिक परख प्रणाली के सभी अभिकर्मक दुनिया भर में उपलब्ध हैं, आसानी से नियंत्रित हैं और अच्छी परीक्षण स्थिरता के साथ हैं, इसलिए दोनों परखों का उपयोग उत्पाद स्थिरता की निगरानी के लिए किया जा सकता है। कार्बोहाइड्रेट बाइंडिंग परख को एसेलुलर पर्टुसिस टीकों के बैच-रिलीज़ के लिए HIST के संभावित विकल्प के रूप में भी माना जा सकता है। इस इन विट्रो परख प्रणाली के लिए प्रोटोकॉल पूरक दस्तावेज़ 1 और 2 के रूप में दिए गए हैं।