फार्मास्युटिका एनालिटिका एक्टा

अमूर्त

सीटीपी: फॉस्फोकोलाइन साइटिडाइलट्रांसफेरेज़ अल्फा (सीसीटीα) siRNA फेफड़ों के कैंसर कोशिकाओं की कोशिका मृत्यु को प्रेरित करता है

रुकिया मारिजानी और बराक ओ. अबोन्यो

सीटीपी: कोलीन साइटिडिलिलट्रांसफेरेज़ (सीसीटी) एक दर सीमित करने वाला एंजाइम है जो सीडीपी-कोलीन मार्ग के माध्यम से फॉस्फेटिडिलकोलीन (पीसी) के संश्लेषण के लिए आवश्यक है, जो सेल प्रसार के लिए महत्वपूर्ण है। सशर्त रूप से सीसीटी गतिविधि की कमी वाली कोशिकाएं एपोप्टोसिस द्वारा मृत्यु से गुजरती हैं। वर्तमान आणविक तकनीकों का उपयोग करके कैंसर कोशिकाओं में सीसीटी अभिव्यक्ति या गतिविधि का निषेध कैंसर कोशिकाओं को मारने का एक उत्कृष्ट गैर विषैला तंत्र प्रदान करेगा। इस अध्ययन का उद्देश्य फेफड़े के कैंसर कोशिकाओं की मृत्यु को प्रेरित करने की उनकी क्षमता का अध्ययन करके एंटीकैंसर एजेंट के रूप में सीसीटी siRNA अनुक्रमों का उपयोग करने की संभावना की जांच करना था। p53 पॉजिटिव, A549 और नेगेटिव, H1299 फेफड़े की उपकला कोशिका रेखाओं को विभिन्न सांद्रता (0-800 nM) CCT siRNA अनुक्रमों (A, B, और C) और स्क्रैम्बल्ड अनुक्रम siRNA (siRNA S) के साथ 24 घंटे के लिए नियंत्रण के रूप में ट्रांसफ़ेक्ट किया गया। वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण द्वारा विभिन्न siRNA द्वारा अभिव्यक्ति निर्धारित की गई थी। सेल संरचना और आकारिकी पर CCT? नॉकडाउन के प्रभाव को देखने के लिए ओलंपस माइक्रोस्कोप का उपयोग किया गया था, जबकि सेल विषाक्तता और अस्तित्व में CCT? siRNA की भूमिका का विश्लेषण सेल टिटर ब्लू (CTB) और लैक्टोज डिहाइड्रोजनेज (LDH) परख द्वारा किया गया था। सभी CCT? siRNA अनुक्रमों ने CCT? प्रोटीन अभिव्यक्ति को महत्वपूर्ण रूप से बाधित किया। माइक्रोस्कोप द्वारा कैप्चर की गई तस्वीरों ने दर्शाया कि अनुपचारित और siRNA S उपचारित कोशिकाएँ बरकरार थीं और उनमें दृश्यमान नाभिक थे जबकि CCT? - siRNA ट्रांसफ़ेक्टेड कोशिकाएँ सिकुड़ी हुई थीं और उनमें एपोप्टोटिक निकायों के समान गहरे दानेदार संरचना वाले नाभिक थे। उच्च CCT? - siRNA सांद्रता में कोशिका झिल्ली पूरी तरह से क्षीण हो गई थी एलडीएच परख ने दिखाया कि सीसीटी?-siRNA ट्रांसफ़ेक्टेड कोशिकाओं ने मृत कोशिकाओं के प्रति अनुपचारित परावर्तक कोशिकाओं की तुलना में उच्च अवशोषण क्षमता प्रदर्शित की। दोनों परखों ने संकेत दिया कि siRNA S उपचारित कोशिकाओं ने अनुपचारित कोशिकाओं के समान परिणाम प्रदर्शित किए, यह सुझाव देते हुए कि कोशिकाओं की मृत्यु CCTasiRNA अवरोध के लिए विशिष्ट थी। इसके अलावा, PC के योग ने CCT?-siRNA उपचारित कोशिकाओं की व्यवहार्यता में सुधार नहीं किया। ये परिणाम प्रदर्शित करते हैं कि CCT?-siRNAs ने CCT? प्रोटीन को नष्ट कर दिया जिसके परिणामस्वरूप कोशिका मृत्यु हुई, जिसका अर्थ है कि अनुक्रम कैंसर रोधी एजेंट के रूप में उपयोगी हो सकते हैं।