जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

रेडियोफ्रीक्वेंसी इलेक्ट्रिक उत्तेजना द्वारा एडीपोज़-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं का चोंड्रोजेनिक विभेदन

मारिया लुइसा हर्नांडेज़-बुले, मारिया एंजेल्स ट्रिलो, मारिया एंजेल्स मार्टिनेज-गार्सिया, कार्लोस अबिलाहौद और एलेजांद्रो उबेडा

उद्देश्य: हालांकि इलेक्ट्रोथर्मल रेडियोफ्रीक्वेंसी धाराओं के ट्रांसडर्मल अनुप्रयोग पर आधारित कैपेसिटिव-रेसिस्टिव इलेक्ट्रिक ट्रांसफर (CRET) थेरेपी ने दर्दनाक या अपक्षयी ऊतक घावों के पुनर्जनन में आशाजनक चिकित्सीय प्रभावकारिता दिखाई है, लेकिन खराब पुनर्जनन क्षमता वाले उपास्थि जैसे ऊतकों पर उनके संभावित प्रभावों का पर्याप्त अध्ययन नहीं किया गया है। यहाँ हम CRET थेरेपी में आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली 448 kHz धारा के संपर्क के प्रभावों की जाँच करते हैं, जो मानव, वसा-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (ADSC) के शुरुआती चोंड्रोजेनिक विभेदन पर होती है।

सामग्री और विधियाँ: स्वस्थ दाताओं से प्राप्त स्टेम कोशिकाओं को 16 दिनों के लिए चोंड्रोजेनिक माध्यम में विभेदित किया गया। ऊष्मायन के अंतिम 2 दिनों के दौरान संस्कृतियों को 448- kHz, साइन वेव करंट के संपर्क में लाया गया या शम-एक्सपोज़ किया गया, जिसे 50 μA/mm ² सबथर्मल घनत्व पर प्रशासित किया गया। सेलुलर प्रतिक्रिया का मूल्यांकन निम्नलिखित द्वारा किया गया: XTT प्रसार परख, ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स (GAG) और कोलेजन क्वांटिफिकेशन (छवि विश्लेषण, ब्लीस्कैन परख और इम्युनोब्लॉट) और चोंड्रोजेनिक कारकों Sox5 और Sox6 की अभिव्यक्ति का विश्लेषण, और प्रतिलेखन कारक ERK1/2 और इसके सक्रिय रूप p-ERK1/2 (इम्यूनोफ्लोरेसेंस, इम्युनोब्लॉट और RT-PCR)।

परिणाम: विद्युत उत्तेजना ने विभेदक संस्कृतियों के बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स में उपास्थि-विशिष्ट कोलेजन प्रकार II और GAG दोनों के स्तर को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ाया। हालाँकि 48-घंटे के उपचार के अंत में SOX जीन की अभिव्यक्ति में कोई परिवर्तन नहीं देखा गया था, लेकिन उत्तेजना ने प्रतिलेखन कारकों L-Sox5, Sox6 और p-ERK1/2 की महत्वपूर्ण अति अभिव्यक्ति को प्रेरित किया। चूँकि ये प्रोटीन चोंड्रोजेनिक विभेदन के दौरान बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स के संश्लेषण के महत्वपूर्ण नियामक हैं, इसलिए यह संभावना है कि उनकी अति अभिव्यक्ति बाह्य कोशिकीय कोलेजन और GAG की सामग्री में देखी गई वृद्धि में शामिल है।

निष्कर्ष: वर्तमान डेटा सेट इस परिकल्पना को समर्थन प्रदान करता है कि CRET उपचारों में लागू इलेक्ट्रोथर्मल उपचार का विद्युत घटक चोंड्रोजेनिक विभेदन को बढ़ावा देकर उपास्थि की मरम्मत को उत्तेजित कर सकता है। ये डेटा, पहले से रिपोर्ट किए गए परिणामों के साथ मिलकर कि एक ही प्रकार के सबथर्मल इलेक्ट्रिक सिग्नल के साथ इन विट्रो उपचार अविभेदित ADSC के प्रसार को बढ़ावा देता है, ऐसे रेडियोफ्रीक्वेंसी धाराओं के संभावित मरम्मत और पुनर्योजी प्रभावों के अंतर्निहित आणविक घटनाओं की पहचान करते हैं।