जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

विभिन्न विभेदन स्थितियों के तहत मानव एडीपोज़ स्ट्रोमल कोशिकाओं का हेपेटोसाइट-जैसी कोशिकाओं में रासायनिक प्रेरण

कोरोनाडो रेमन, सोमारकी-कॉर्मियर मारिया, नटेसन शनमुगासुंदरम, क्रिस्टी रॉबर्ट, ओंग जू और हाफ ग्लेन

पृष्ठभूमि: प्रत्यारोपण के लिए दाता यकृतों की कमी ने अंतिम चरण के यकृत रोग के इलाज के लिए संपूर्ण अंग प्रत्यारोपण के विकल्प के रूप में कोशिका चिकित्सा में रुचि बढ़ाई है। प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स का उपयोग कोशिका-आधारित उपचारों में किया गया है। हालांकि, हेपेटोसाइट्स इन विट्रो में गुणा नहीं करते हैं इसलिए सफल प्रत्यारोपण के लिए पर्याप्त कोशिकाओं को विकसित करना चुनौतीपूर्ण है। कई लोगों ने विकल्प के रूप में हेपेटोसाइट जैसी एडीपोज-व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्ट्रोमल/स्टेम कोशिकाओं (एएससी) को हेपेटोसाइट जैसी कोशिकाओं में विभेदित करने का सुझाव दिया है। यहां हम मूल्यांकन करते हैं कि ये कोशिकाएं प्राथमिक हेपेटोसाइट कोशिका आकृति विज्ञान और कार्य से कितनी मिलती जुलती हैं।
तरीके: मानव एएससी को लिपोएस्पिरेट्स से यंत्रवत् अलग किया गया प्राथमिक ASCs तेजी से जुड़े और इन विट्रो में बढ़े , जिससे एक सजातीय धुरी जैसी कोशिका मोनोलेयर बनी। मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं ने CD73, CD90, CD271, CD44, CD166, CD105 मार्करों की उच्च अभिव्यक्ति दिखाई और सफलतापूर्वक ओस्टियोसाइट्स, कोन्ड्रोसाइट्स और एडीपोसाइट्स में विभेदित हुए। ASCs को टाइप I कोलेजन लेपित प्लेटों पर संवर्धित किया गया और 5 अलग-अलग प्रोटोकॉल का उपयोग करके हेपेटोसाइट्स जैसी कोशिकाओं में विभेदित किया गया।
परिणाम: प्रोटोकॉल C (FGF4 के साथ प्रेरण और HGF, ITSPre, Dex, OncM और 2% सीरम के साथ परिपक्वता) का उपयोग करके ASCs हेपेटोसाइट्स जैसी कोशिकाओं में विभेदित हुए, एक घनाकार आकारिकी प्रदर्शित की। जैवसक्रियता परख ने यूरिया को संश्लेषित करने, LDL को ग्रहण करने और ग्लूकोज को चयापचय करने की उनकी क्षमता का प्रदर्शन किया; हेपेटोसाइट्स की सभी प्रमुख विशेषताएं, जो अविभेदित ASCs में मौजूद नहीं हैं। जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण ने कई जीनों की अभिव्यक्ति भी दिखाई, जिन्हें लिवर फ़ंक्शन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए जाना जाता है, जिनमें TDO2, ALB, HNF1B1, HNF6b, HNF4a और AFP शामिल हैं। हालाँकि, इस अध्ययन में प्राप्त सबसे अच्छे हेपेटोसाइट-जैसे प्रेरित ASC में भी प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स की तुलना में हेपेटोसाइट-संबंधित जीन अभिव्यक्ति का स्तर बहुत कम था।
निष्कर्ष: हमने ASC को हेपेटोसाइट-जैसी कोशिकाओं में सफलतापूर्वक विभेदित किया; प्रोटोकॉल C ने प्राथमिक हेपेटोसाइट्स में आमतौर पर देखी जाने वाली आकृति विज्ञान और कार्य के आधार पर सबसे अच्छी हेपेटोसाइट-जैसी कोशिकाएँ उत्पन्न कीं। हालाँकि परिणामों ने कुछ हेपेटोसाइट-संबंधित फ़ंक्शन दिखाए, लेकिन हेपेटोसाइट-जैसी कोशिकाओं की बायोएक्टिविटी और जीन अभिव्यक्ति की तुलना प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स की तुलना में बहुत कम थी, यह सुझाव देते हुए कि हेपेटोसाइट्स को बदलने के लिए विभेदित हेपेटोसाइट-जैसी ASC का उपयोग करने पर विचार करते समय सावधानी बरतनी चाहिए। हेपेटोसाइट-जैसी ASC की कार्यात्मक क्षमता को बेहतर ढंग से समझने के लिए और कौन सा विशिष्ट चयापचय फ़ंक्शन संभावित रूप से चिकित्सीय अनुप्रयोग प्रदान कर सकता है, इसके लिए आगे के अध्ययनों की आवश्यकता है।