सुबोध कुमार, दिवेश चावला और अशोक कुमार त्रिपाठी
पर्याप्त धूप के बावजूद, भारत में विटामिन डी की कमी (वीडीडी) एक महामारी है। सभी आयु समूहों में 50-90% आबादी वीडीडी से जुड़ी है। विटामिन डी आकलन के लिए उपलब्ध सामान्य तरीकों (आरआईए, इम्यूनोएसे आदि) में से एचपीएलसी जैसी विश्लेषणात्मक विधि को स्वर्ण मानक माना जा रहा है। प्रस्तावित अध्ययन में, हमने अधिक परिशुद्धता और शुद्धता के साथ विटामिन डी3 के आकलन के लिए आरपी-एचपीएलसी विधि विकसित की है। दो अलग-अलग मोबाइल चरणों यानी एसिटोनाइट्राइल: मेथनॉल (विधि I) और मेथनॉल: 0.1% फॉर्मिक एसिड (विधि II) के साथ पानी का उपयोग करके आइसोक्रेटिक मोड में C18 कॉलम पर पृथक्करण प्राप्त किया गया था। कॉलम को 40 °C पर बनाए रखा गया था और मोबाइल चरण को 0.4 mL min−1 की प्रवाह दर पर पंप किया गया था विधि I और II के लिए विटामिन डी3 का अवधारण समय क्रमशः 7.14 और 7.01 मिनट पाया गया, जिसमें R2>0.99 था। मानक वक्र 0.5-5 ng mL−1 की सांद्रता सीमा पर रैखिक थे। विधि I और II के लिए विटामिन डी3 के लिए LOD और LOQ मान क्रमशः 1.64, 5.02 और 1.10, 3.60 ng mL−1 पाए गए। विधि I और II के लिए प्रतिशत पुनर्प्राप्ति क्रमशः 69-79% और 75-87% पाई गई। विधि I की इंट्रा और इंटर-डे परिशुद्धता का% RSD <2 और <7% पाया गया, जबकि विधि II के लिए क्रमशः <2 और <4% पाया गया। निष्कर्ष में, विधि II ने अधिक परिशुद्धता और सटीकता दिखाई और लागत प्रभावी भी रही, इसलिए, इसका उपयोग प्रयोगशाला पैमाने पर विटामिन डी3 अनुमान के लिए किया जा सकता है।