जर्नल ऑफ़ प्लांट पैथोलॉजी एंड माइक्रोबायोलॉजी

अमूर्त

टमाटर के फल से पेपिनो मोजेक वायरस आरएनए अलगाव की एक सरल, तीव्र और कुशल विधि

अमल सौरी, मुस्तफा ज़ेमज़ामी, खदीजा खताबी, हयात लातिरिस, सईद अमज़ाज़ी और मौले मुस्तफा एनाजी

पौधों में आरएनए वायरल रोगजनकों के आणविक पता लगाने में मुख्य चिंता निकाले गए आरएनए की अच्छी गुणवत्ता की उपलब्धि है। पॉलीसैकेराइड-समृद्ध और खराब ऊतकों और अन्य अड़ियल पौधों से आरएनए को अलग करने के विभिन्न तरीके उपलब्ध हैं। हालांकि, समय और अभिकर्मक लेने वाली विधियों और खतरनाक रसायनों को शामिल करने वाली विधियों का उपयोग कुछ हद तक बोझिल और समस्याग्रस्त है, खासकर जब यह टमाटर के फल से वायरल आरएनए को अलग करने जैसे विशिष्ट उद्देश्यों के लिए आवश्यक नहीं है, इसलिए इस पेपर का उद्देश्य है। हम टमाटर के फल से वायरल आरएनए तैयार करने के लिए आरएनए निष्कर्षण और शुद्धिकरण चरणों के बिना एक वैकल्पिक, सरल और तेज़ विधि का वर्णन करते हैं, पेपिनो मोज़ेक वायरस ( पेपएमवी ) का मामला।

इस विधि में यांत्रिक उपचार और पानी में निलंबन का उपयोग किया जाता है। प्राप्त आरएनए की गुणवत्ता को स्पेक्ट्रोमेट्रिक रीडिंग द्वारा आंका गया और आरटी-पीसीआर परख में मान्य किया गया। उपयोग किए गए प्रोटोकॉल की तुलना सामान्य ट्राइज़ोल विधि से की गई। परिणामों से पता चला कि प्रस्तावित विधि का उपयोग करके प्राप्त आरएनए की उपज और गुणवत्ता ट्राइज़ोल विधि की तुलना में कुशल और उच्च उपज वाली है। इसके अलावा, विकसित विधि ने आरटी-पीसीआर में पेपएमवी पूर्वानुमानित बैंड का संवेदनशील और पुनरुत्पादनीय पता लगाने की सफलतापूर्वक अनुमति दी। इस प्रकार, टमाटर के फल से पेपएमवी का आणविक पता लगाना नियमित रूप से बिना किसी तीखे आरएनए अलगाव के किया जा सकता है। साथ ही, यह टमाटर की फसलों को संक्रमित करने वाले अन्य आरएनए वायरस का निदान आसान और कम समय लेने वाला बना देगा, महंगे वाणिज्यिक किट और जहरीले रसायनों से युक्त अन्य विधियों की तुलना में। अंत में, वर्णित स्थापित विधि दुनिया भर में टमाटर की फसलों के फाइटोसैनिटरी और प्रमाणन कार्यक्रमों की रणनीतियों में प्रभावी रूप से योगदान देगी।